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病毒包裝服務(wù)

        在將外源基因?qū)氚屑?xì)胞或組織的過程中,病毒的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率比真核生物表達(dá)載體高很多,特別適合于介導(dǎo)外源基因在難轉(zhuǎn)染甚至無(wú)法轉(zhuǎn)染細(xì)胞中的表達(dá)。

1.慢病毒服務(wù)

        慢病毒(Lentivirus)載體是以HIV-1(人類免疫缺陷1型病毒)為基礎(chǔ)發(fā)展起來(lái)的基因治療載體。它能高效的將目的基因(或RNAi)導(dǎo)入動(dòng)物和人的原代細(xì)胞或細(xì)胞系。具有感染譜廣泛、可以有效感染分裂期和靜止期細(xì)胞、長(zhǎng)期穩(wěn)定表達(dá)外源基因等優(yōu)點(diǎn)。慢病毒表達(dá)載體包含了包裝、轉(zhuǎn)染、穩(wěn)定整合所需要的遺傳信息。慢病毒包裝質(zhì)粒可提供所有的轉(zhuǎn)錄并包裝RNA到重組的假病毒載體所需要的所有輔助蛋白。目的基因進(jìn)入到宿主細(xì)胞之后,經(jīng)過反轉(zhuǎn)錄,整合到基因組,從而高水平的表達(dá)效應(yīng)分子。

圖:慢病毒介導(dǎo)的基因過表達(dá)原理示意圖
 
圖:GFP融合標(biāo)簽的過表達(dá)慢病毒感染目標(biāo)細(xì)胞在熒光顯微鏡下的感染效率

2.腺病毒服務(wù)

        腺病毒作為進(jìn)行基因轉(zhuǎn)移和表達(dá)的工具,是一種無(wú)包膜的雙鏈線性DNA病毒,其直徑約為90-100nm,衣殼為廿面體,包含240個(gè)六鄰體和12個(gè)五鄰體?;蚪M長(zhǎng)度約為36kb,兩端各有一個(gè)103bp的反向末站重復(fù)序列(ITR),參與病毒DNA的復(fù)制,其復(fù)制不依賴于宿主細(xì)胞的分裂。
        相較于細(xì)胞轉(zhuǎn)染和其他病毒運(yùn)載系統(tǒng),腺病毒主要具有以下特點(diǎn):①感染細(xì)胞的種類多,覆蓋了除抗腺病毒感染的淋巴瘤細(xì)胞之外的大部分細(xì)胞;②感染細(xì)胞的效率高:攜帶的目的基因表達(dá)高效;③病毒可達(dá)到的滴度高,我們公司腺病毒滴度能夠達(dá)到1010pfu/ml,能滿足普通細(xì)胞實(shí)驗(yàn)要求,也能提供高滴度腺病毒,能夠達(dá)到1011pfu/ml;④制備便捷,擴(kuò)增容易;⑤無(wú)插入致突變性:無(wú)需整合在染色體中;⑥病毒保存的穩(wěn)定性高:-80℃不反復(fù)凍融的情況下能夠保存兩年。

圖:腺病毒實(shí)驗(yàn)結(jié)果示例