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產品名稱:2×Taq PCR 預混試劑Ⅱ(含染料)

產品編號:BLGE181-5ML

產品規(guī)格:5ML
產品組成
產品貨號
BLGE181-5ML
2×Taq PCR MasterMix Ⅱ 5×1 ml
Loading dye in MasterMix Ⅱ  
ddH2O 5 ml

說明書


產品情況:本產品含有高純度的Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應緩沖液、PCR反應增強劑和優(yōu)化劑以及穩(wěn)定劑,為2倍濃度的即用型PCR預混試劑。具有快速簡便、靈敏度高、特異性強、擴增效率高、穩(wěn)定性好等優(yōu)點,可減少人為誤差、節(jié)約操作時間、降低污染幾率。
本產品不同批次之間誤差很小,適合大規(guī)?;驒z測,半定量PCR實驗和微量DNA的檢測;也適用于常規(guī)PCR擴增、DNA標記、引物延伸、序列測定等;特別適合于較長片段(≤5 kb)的擴增和一些有特殊結構的復雜模板如GC含量較高(60%<GC≤70%),有二級結構等DNA擴增;本產品無外源核酸酶活性,能有效地擴增人基因組中的單拷貝基因;本產品PCR產物帶A,純化后可直接用T/A載體克隆。
 
儲存運輸:冰袋運輸;
室溫(15~25℃)可存放一周;如需經常使用,可存放于4℃;-20℃可長期保存,多次凍融不影響活性。

注意事項:
(一)凍存的2×Taq PCR MasterMix Ⅱ需提前置于冰上解凍,若經常使用可于4℃保存;
(二)PCR反應體系需在冰上進行配制;
(三)PCR反應程序設置時,退火溫度可根據(jù)反應體系中引物的Tm值進行適當調整;
(四)操作時請做好個人防護,穿實驗服并佩戴一次性手套。
 
實驗流程:
本產品使用時取適量2×Taq PCR MasterMix Ⅱ溶液,加入模板和引物,并加入ddH2O水補足體積,使MasterMix Ⅱ溶液的濃度為1×即可進行反應。
(一)PCR反應體系(以下舉例僅供參考):
組成成分 體積 終濃度
Template < 1 µg -
Primer F (10 µM) 0.5 µl 0.25µM
Primer R (10 µM) 0.5 µl 0.25µM
2×Taq PCR MasterMix Ⅱ 10 µl
ddH2O 補至20 µl -
 
注:以人基因組DNA為模板,擴增1 kb的片段,反應體系為20 µl(如反應體系不同,可按此比例增加或減少用量)。
(二)PCR反應程序(以下舉例僅供參考):
溫度 反應時間 循環(huán)數(shù)
94℃ 3 min 1
94℃ 30 sec 30~35
58℃ 30 sec
72℃ 1 min/kb
72℃ 5 min 1
4℃ holding 1
 
(三)結果檢測
產品已添加染料,為藍色,反應結束后直接取6 µl反應產物上樣,進行瓊脂糖凝膠電泳檢測;根據(jù)上樣孔大小可適當調整上樣量。
 
本產品僅供科研使用,不得用于臨床診斷!