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產(chǎn)品名稱：紅細(xì)胞裂解液
產(chǎn)品編號(hào)：BLCK015-250ML/BLCK015-500ML
產(chǎn)品規(guī)格：250ML/500ML
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說(shuō)明書(shū) |
產(chǎn)品情況：本產(chǎn)品紅細(xì)胞裂解液（Red Blood Cell Lysis Buffer，或稱ACK Lysis Buffer），是一種經(jīng)典的用于去除紅細(xì)胞的裂解液，在不損傷有核細(xì)胞的前提下充分去除紅細(xì)胞。經(jīng)紅細(xì)胞裂解液裂解得到的組織細(xì)胞中不含紅細(xì)胞，可進(jìn)一步用于原代培養(yǎng)、細(xì)胞融合、流式細(xì)胞分析、核酸與蛋白的分離及提取等。其基本原理是利用細(xì)胞內(nèi)滲透壓濃度差而導(dǎo)致細(xì)胞膜脹破的原理裂解紅細(xì)胞。主要成分包含氯化銨、碳酸氫鉀、EDTA-Na2。因銨根離子無(wú)法通過(guò)細(xì)胞膜，而其他離子可以通過(guò)，造成細(xì)胞內(nèi)外的離子濃度差異，外部水分?jǐn)U散至細(xì)胞內(nèi)，使紅細(xì)胞膨脹，達(dá)到裂解效果。本產(chǎn)品經(jīng)0.2μm濾膜過(guò)濾除菌。
儲(chǔ)存運(yùn)輸：冰袋（wet ice）運(yùn)輸；4℃保存，有效期12個(gè)月。
使用說(shuō)明：
組織細(xì)胞樣品：
（一）新鮮組織經(jīng)胰酶或膠原酶等消化分散成單個(gè)細(xì)胞懸液，離心棄去上清液；
（二）按1:3-5比例向細(xì)胞沉淀中加入紅細(xì)胞裂解液，輕輕吹打混勻，裂解1-2 min；
（三）800-1000 rpm離心5-8 min，離心棄去上層紅色清液；
（四）收集沉淀部分，加入Hank’s液或無(wú)血清培養(yǎng)液離心洗2-3次；
（五）如裂解不完全可重復(fù)步驟二和三；
（六）根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要用適當(dāng)溶液重懸細(xì)胞，用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)；如提取RNA，最好是于步驟四開(kāi)始使用DEPC水配制的溶液。
血細(xì)胞：
（一）新鮮抗凝血，離心棄去上清液；
（二）按1:6-10比例向細(xì)胞沉淀中加入紅細(xì)胞裂解液，輕輕吹打混勻，裂解1-5 min；
（三）800-1000 rpm離心5-8 min，離心棄去上層紅色清液；
（四）收集沉淀部分，加入Hank’s液或無(wú)血清培養(yǎng)液離心洗2-3次；
（五）如裂解不完全可重復(fù)步驟二和三；
（六）根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要用適當(dāng)溶液重懸細(xì)胞，用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)；如提取RNA，最好是于步驟四開(kāi)始使用DEPC水配制的溶液進(jìn)行。
注意事項(xiàng)：
（一）本品經(jīng)過(guò)濾除菌，使用時(shí)請(qǐng)注意無(wú)菌操作，避免細(xì)菌污染。
（二）后續(xù)試驗(yàn)如是用于細(xì)胞培養(yǎng)，操作過(guò)程中應(yīng)注意在超凈工作臺(tái)中完成，并注意無(wú)菌操作，以免細(xì)胞被污染，影響細(xì)胞培養(yǎng)。
（三）在離心洗滌后，如發(fā)現(xiàn)極微量的紅細(xì)胞，可繼續(xù)試驗(yàn)，不會(huì)影響后續(xù)檢測(cè)。
（四）操作時(shí)請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服，佩戴一次性手套。
本產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于臨床診斷！