桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞蛋白表達(dá)
昆蟲桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)(Baculovirus expression vector system, BEVS)是以昆蟲桿狀病毒為外源基因載體，昆蟲和昆蟲細(xì)胞為受體的真核表達(dá)系統(tǒng)，目前兩個(gè)應(yīng)用最廣泛的商業(yè)化細(xì)胞系是草地貪紋夜蛾（Spodoptera frugiperda）卵巢細(xì)胞系Sf9和粉紋夜蛾（Trichoplusia ni）胚胎細(xì)胞系BTI-Tn-5Bl-4（High Five）。該系統(tǒng)具有重組蛋白表達(dá)量高，能夠在一個(gè)載體上表達(dá)多種大規(guī)模蛋白。
服務(wù)優(yōu)勢(shì)
1）技術(shù)成熟，有多種昆蟲細(xì)胞進(jìn)行表達(dá)；
2）蛋白表達(dá)量高；
3）表達(dá)的蛋白生物活性好，能進(jìn)行正確的折疊和修飾。
服務(wù)流程
Fig. 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞表達(dá)技術(shù)流程圖
服務(wù)周期
| 服務(wù)內(nèi)容 | 周期 | |
|---|---|---|
| 重組質(zhì)粒構(gòu)建 | 克隆目的基因至載體 | 1~2周 |
| 轉(zhuǎn)化、分析、分離、鑒別重組質(zhì)粒 | ||
| 質(zhì)粒大提 | ||
| 桿狀病毒包裝及擴(kuò)增 | 轉(zhuǎn)染昆蟲細(xì)胞 | 2周 |
| 制備P1病毒儲(chǔ)液 | ||
| 擴(kuò)增桿狀病毒儲(chǔ)液 | ||
| 表達(dá)及純化 | 病毒感染細(xì)胞 | 1周 |
| 分離純化重組蛋白（小試） | ||
| SDS-PAGE 分析 | ||
| 大量表達(dá)及純化 (中試) | 2~3周 | |
應(yīng)用
